A Rac1 / PAK1 kaszkád szabályozza a β-catenin aktivációt vastagbélrák sejtekben

Vastagbélrák gpc 2020.

Itt megmutatjuk, hogy a PAK1 csökkenése a vastagbélrákos sejtekben csökkenti a teljes β-catenin szintet, valamint a sejtproliferációt.

Végbélnyíláskörnyéki fisztula leggyakoribb okai

Mechanikusan a PAK1 közvetlenül foszforilálja a β-catenin fehérjéket a Ser helyén, és ez stabilabb és transzkripciós aktív β-cateninhez vezet. Ezeknek az eredményeknek a megerősítésére a PAK1 teljes Wnt jelzésre van szükség, és a β-catenin szuperaktiválása az adenomatózisú polipozisz coli fehérje egyidejű leállításával és a PAK1 aktiválásával érhető el.

Ráadásul kimutattuk, hogy a Rac1 a PAK1-et megelőzően a vastagbélrák sejtekben működik, és hozzájárul a β-catenin foszforilációjához és felhalmozódásához. A β-catenin a Wnt jelátvitel fő sejtszintű effektora, és általában az axinből, az APC-ből adenomatózus polipozisz coli fehérjea glikogén szintáz kináz-3p-ből és a kazein-kinázból 1a származó, a foszforiláció és ubiquitináció utáni proteaszóma-bomlást elősegítő komplex.

Polakis, ; MacDonald et al. Ebben a komplexben az axin olyan állványként szolgál, amely megkönnyíti a fehérje-fehérje kölcsönhatásokat.

A kazein-kináz-1a és a glikogén-szintáz kináz-3β szekvenciálisan foszforilálja a β-catenin N-terminális maradékait, és ez létrehozza az E3-ligáz β-Trcp felismerő vastagbélrák gpc 2020. Az APC szintén fontos a β-catenin befogásához a bomlási komplexben, és β-cateninhez kötődik közvetlenül a központilag lokalizált armadillo ismétléseken keresztül Xing et al.

A Wnt jelátviteli transzdukció és a rákos sejtproliferáció kulcsfontosságú eseménye a β-catenin stabilitásának és aktivitásának szabályozása.

Épp itt vagy:

Az N-terminális aminosavakon kívül a Ser Fang és vastagbélrák gpc 2020. A vastagbélrák a legszélesebb körben vizsgált Wnt-vel kapcsolatos rák, mivel az APC vagy a β-catenin mutációi a rákos minták nagy részét teszik ki Ilyas et al.

Mindkét esetben emelkedett β-catenint figyeltek meg és bizonyították, hogy felelős a rák előrehaladásáért Bienz és Clevers, ; Valentini et al. A közelmúltban azonban azt állították, hogy az APC mutáció önmagában valószínűleg nem elegendő a teljes β-catenin jelátvitel előmozdításához Anderson et al. Azonban a Rac1 képes volt a citoszol és a β-catenin nukleáris szintjének emelésére is Esufali és Bapat, Arra gondoltunk, hogy vizsgáljuk-e, hogy a Rac1, Paktivált kináz PAK egy másik alulfolyó effektorja volt.

Ennek a hipotézisnek az papilláris elváltozás vastagbélrák gpc 2020 mind a Rac1, mind a PAK1 a vastagbélrák mintákban túlaktiváltak Esufali és Bapat, ; Kumar et al.

vastagbélrák gpc 2020

A PAKs szerin és treonin protein kinázok, amelyek fontosak a sejtmotilitás és a túlélés szempontjából Bokoch, ; Arias-Romero és Chernoff, A PAK-eknek a rákok széles körében onkogén funkciói vannak, és túlaktiválásuk jól dokumentált Kumar et al. A PAK1 szintén foszforilálja az ösztrogén receptor α-t Serben, hogy stimulálja a célgének transzkripcióját és az emlőmirigy hiperpláziáját Wang és mtsai.

A vastagbélrákos szövetekben a megnövekedett PAK1 expresszió korrelált a rák progressziójával és a nyirokcsomó-áttétekkel Carter és mtsai. Azonban kevés volt ismert a molekuláris mechanizmusról, amellyel a PAK1 elősegíti a vastagbélrák előrehaladását. Bizonyítékok mutatták, hogy a PAK1 a β-cateninhez kapcsolódik a gyomor epiteliális sejtvonalban He és mtsai,és hogy a PAK1 lefelé történő szabályozás gátolta az inzulin által stimulált nukleáris β-catenin felhalmozódást Sun et al.

Janet Sweeney, Ph. Egyes kannabiszkivonatok magas THC-szintje miatt a betegek gyakran intenzív pszichotróp hatásokat tapasztalnak, ami fokozhatja a paranoiát és a szorongást. Az előzetes kutatások azt mutatták, hogy a citikolin kiegészítők segítenek a fókusz és a mentális energia javításában, és esetleg hasznosak lehetnek a figyelemhiányos rendellenesség kezelésében. A citikolint természetesen megtalálható a szervezetben. Corrie Yellandegy rák túlélő, beszámol arról, hogy a kannabiszkivonat használata alatt a pszichotróp hatás nagyon intenzívvé vált.

Eredmények A PAK1 a vastagbélrák sejtek vastagbélrák gpc 2020 szükséges Annak érdekében, hogy tisztázzuk a PAK1 szerepét a vastagbélrákos sejtekben, számos stratégiát alkalmaztunk az endogén PAK1 aktivitás gátlására SW vagy HCT sejtekben, majd a sejt proliferáció mérését kolónia képződési vizsgálattal és áramlási citometriával. Összességében ezek az eredmények azt mutatják, hogy a PAK1 vastagbélrák gpc 2020 vagy annak aktivitásának csökkenése gátolja a sejtszaporodást, ami arra utal, hogy a PAK1 központi szerepet játszik a vastagbélrák sejtek proliferációjának előmozdításában.

A PAK1 elősegíti a vastagbélrákos sejtek proliferációját. Következésképpen a β-catenin SW sejtek shRNS-ével történő kopogása G1 fázis letiltást és a kolónia képződés gátlását okozza, amit a ciklin D1 szint jelentős csökkenése kísér 1A — E kiegészítő ábrák.

Az a tény, hogy a PAK1 vagy a β-catenin gátlása hasonló hatásokat váltott ki, arra utal, hogy a PAK1 elősegítheti a sejtproliferációt, legalábbis részben a β-catenin jelátvitelen keresztül. Ennek a vastagbélrák gpc 2020 a teszteléséhez a teljes β-catenint G4P-vel jelölt PAK1 — KA-val transzfektált SW sejtekben festettük, és a β-catenin jel drasztikus csökkenését figyeltük meg Kiegészítő ábra 2A.

Következésképpen ezekben a sejtekben a β-catenin festés szignifikánsan gyengébb volt 2a.

GPC x Greeny - Wo Du groß wirst (prod. by Bobby San)

Ábra vastagbélrák gpc 2020 a teljes β-catenin fehérje szintje jelentősen csökkent az alacsonyabb ciklus D1-vel 2b. A PAK1 szükséges a β-catenin felhalmozódásához vastagbélrák sejtekben.

vastagbélrák gpc 2020

A p-catenin és a sejtmagok vörös és kék DAPI voltak. Teljes méretű kép Ezután megvizsgáltuk, hogy az IPA-3 képes-e csökkenteni a β-catenin szintet a vastagbélrák sejtekben.

A Rac1 / PAK1 kaszkád szabályozza a β-catenin aktivációt vastagbélrák sejtekben

Az IPA-3 kezelés során a β-catenin szint 6 óra alatt csökkent, és a ciklin D1 is fokozatosan csökkent 2. Amint az a 2f. Ábrán látható, a teljes β-catenin, valamint a ciklin D1 szintje 20 μM vagy nagyobb IPA-3 koncentrációval szignifikánsan csökkent. Mindezek alapján ezek az eredmények azt mutatják, hogy az endogén PAK1 szükséges a magas β-catenin szint fenntartásához ezekben a vastagbélrákos sejtekben, és arra utal, hogy a PAK1 elősegíti a sejtproliferációt a β-catenin révén.

Bejegyzés navigáció

A PAK1 kölcsönhatásba lép foszforilálódik a β-catenin és az S között Ahhoz, hogy a PAK1 szabályozza a β-catenin fehérjeszintjét, először ko-immunprecipitációs kísérleteket végeztünk, és megállapítottuk, hogy az endogén β-catenin specifikusan kicsapódott PAK1-gyel az SW sejtekből 3a.

A sejtfrakciót követően a ko-immunprecipitáció azt is vastagbélrák gpc 2020, hogy a PAK1 és a β-catenin közötti kölcsönhatás főként a citoplazmában fordult elő Kiegészítő ábra 2E.

Ezután együtt transzfektáltuk a Flag-β-catenin-t vastagbélrák gpc 2020 PAK1 vagy Rac1 konstrukciókkal együtt, és meggyőződtünk arról, hogy ezek közül bármelyik képes-e elősegíteni a β-catenin foszforilációját a kereskedelemben kapható Phos-S vagy Phos-S elleni antitestek alkalmazásával. Az Rac1-et is belefoglaltuk, mivel a PAK1-et megelőzően működik. Amint az várható volt, mind az S, mind az S erősen foszforilálódott a forskolin kezelés során 3b. Annak megállapítására, hogy a PAK1 közvetlenül képes foszforilálni vastagbélrák gpc 2020 p-catenint, in vitro kináz vizsgálatot végeztünkamelyben a transzfektált HEKT sejtekből származó immunprecipitált PAK1 fehérjéket E.

Ezért a PAK1 képes specifikusan foszforilálni a β-catenin Serét. A PAK1 kölcsönhatásba lép a β-cateninnel és foszforilálja Seren. IB, immunoblot.

vastagbélrák gpc 2020

A sejtlizátumokat anti-Flag M2 antitesttel immunizáltuk. Az összes lizátumot és IP-t IB-vel kezeltük a jelzett antitestekkel.

Boros Miklós, sebész A külső nyílás ezen típusú sipolyoknál a végbélnyílás körül található a gáttájékon. Ritkán távolabbra is vezet, ekkor mindig keresni kell a háttérben meghúzódó betegséget. Mi az a sipoly fisztula? A hétköznapi szóhasználatban sipolynak nevezett elváltozás jelentése kóros összeköttetés szervek vagy testüregek között belső sipolymelyen keresztül folyadék, szilárd anyag természetellenesen halad, vagy a külvilággal kóros összeköttetés jön létre. Ezek a kóros összeköttetések lehetnek veleszületettek, baleset, fertőzés vagy műtéti beavatkozás következményeként is kialakulhatnak.

A forskolint pozitív kontrollként használták. A GFP-pozitív sejteket 48 órával később szortírozottuk, és a sejt-lizátumokat IB-vel kezeltük a jelzett antitestekkel.

Mi az a sipoly (fisztula)?

A β-catenin relatív mennyiségét a GFP-transzfektált sejtekben 1, 0-nek vastagbélrák gpc 2020. Teljes méretű kép Ezt követően megvizsgáltuk, hogy a PAK1 aktivitás hozzájárul-e az S foszforilációhoz vastagbélrák sejtekben. Amint azt a 3e.